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可以用荧光显微镜同时记录两个发射波长的荧光强度吗?

作者:admin 浏览量:356 来源:本站 时间:2022-12-23 11:47:16

信息摘要:

这种操作是可以实现的,但具体到你的这个设计方案,可能实现不了。先说典型怎么实现:你先至少需要一台研究级荧光显微镜,这是因为研究级荧光显微镜可以搭配汞灯或者宽光谱大功率LED光源MG-100、四通道LED光源MG-120等宽光谱灯箱,光源可以同时发射出多个激发波长。

这种操作是可以实现的,但具体到你的这个设计方案,可能实现不了。先说典型怎么实现:至少需要一台研究级荧光显微镜,这是因为研究级荧光显微镜可以搭配汞灯或者宽光谱大功率LED光源MG-100、四通道LED光源MG-120等宽光谱灯箱,光源可以同时发射出多个激发波长。

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然后你需要配一个双通荧光激发块,比如FISH常用的BG双通激发块,这种激发块能同时通过B蓝色和G绿色两种激发波段,然后实现两个通道荧光同时发射,直接形成双色荧光,就不用切换激发块了。

然后来说题主说的情况,ZUI大激发波长差不多,那么你可能不需要研究级的荧光显微镜,由无限远光学显微镜升级数显荧光??榈募蛞子庀晕⒕稻凸荒慵し⒘?,不能外接灯箱。

简易荧光显微镜,利用整合的数显荧光??樘峁┘し⒐庠春团涮椎募し⒖椋荒芡饨拥葡?,因此难以实现双通激发,但BGU等单通道激发都是没有任何毛病的,效果一样很好,很多医院和科研机构也在使用。

难点在于发射波长,发射波长通常指染料的发射峰值,在发射峰值的前后都会有一个光谱范围属于发射波长,如果两个染料的发射峰值并没有差太远,实际的发射光就很容易重叠,肉眼或者显微相机无法区分这种情况,你可能需要有个积分器或者光谱仪才好办。

而且回到激发块上,如果两个发射光差很多,那么简易荧光显微镜可能也搞不了,你可能需要定制一个特殊的荧光??槔醋黾蛞子庀晕⒕?,或者用研究级宽场荧光,然后定制一个特殊的激发块装上去,比如,DAPI+Fura2,需要U的激发滤光片,BG双通的发射滤光片。

综上,我感觉不乐观,因为发射峰值不是相差很远的情况下,发射光很大概率会出现重叠,肉眼和相机都无法区分这种光谱相近的光,就好比365nm390nm都是紫外,但你不用积分球、光谱仪是很难区分两者的。

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